山苍子( Litsea cubeba) 又名山鸡椒、木姜子、山胡椒、香桂等,为樟科木姜子属植物。山苍子作为我国优良的木本芳香油料和药材树种。山苍子油是具有柠檬香气的黄色油状液体,无毒,其主要成分为柠檬醛,含量可高达70% ~80%,其它成分则为柠檬烯、甲基庚烯酮、芳樟醇、香叶醇、蒎烯等。研究表明,山苍子油具有多种功效,它作为中药具有健胃消食、祛风散寒、消肿止痛之功效;可以有效抑制肺癌、肝癌和口腔癌细胞生长;可以抑制副溶血性弧菌,李斯特菌和异常汉逊酵母菌这些对人类身体健康有严重危害的菌类生长;具有很好的抗氧化的作用,因此已被广泛的用于化工、食品及医疗行业。
山苍子油的抑菌活性及机理研究
吴均、杨钦滟、赵晓娟、阚建全、杜木英
试验目的
采用抑菌圈实验和试管二倍稀释法对山苍子油的抑菌活性、最低抑菌浓度( MIC) 进行测定。
试验方法
1、抑菌圈直径测定
采用培养基打孔法: 用无菌打孔器在含菌平板上打孔,取20μL 山苍子油于孔中,细菌于37℃下培养24h,霉菌于28℃下培养48 h,每组3 个平板,每个平板放置3 片滤纸,重复3 次,选取抑菌圈比较明显的平板测定抑菌圈直径,结果取3次重复实验的平均值。
2、热处理对山苍子油抑菌活性的影响
将山苍子油分别置于 40、60、80、100、121 ℃ 下热处理10min,然后按照方法1进行测定。
3、最小抑菌质量浓度( MIC) 的测定
采用二倍稀释法,配制一系列梯度浓度的山苍子油溶液,将不同梯度浓度的溶液加入融化的固体培养基中混合均匀,使培养基中所含精油浓度分别为30、15、7.5、3.75、1.88、0.94、0.47、0.23、0.11 μL/mL。待培养基凝固后,用移液枪吸取200μL 菌悬液,均匀涂布于固体培养基表面。以不长菌时的山苍子油的体积浓度来确定精油抑菌的最低体积浓度为精油的MIC 值,以乙醇-无菌水作对照。
试验结果
1、山苍子油抑菌活性测定
通过测定山苍子油对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和黑曲霉的抑菌圈直径大小比较精油对这4 种菌的抑菌效果,结果见表1。
由表1可以看出,山苍子油对所有对供试菌均有较强的抑制效果,抑菌圈直径均在15mm 以上,属于高度敏感,其中山苍子油对霉菌的抑制效果最强,呈无菌生长状态。综合比较来看,其抑菌效果为黑曲霉> 大肠杆菌> 金黄色葡萄球菌> 枯草芽孢杆菌。
2、热处理对山苍子油抑菌效果的影响
由图1 可见,经不同温度处理的山苍子油对供试菌的抑菌圈直径没有明显变化,其中山苍子油对黑曲霉的抑菌作用最好,抑菌圈直径高达90mm,对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和大肠杆菌的抑菌圈效果相差不是很大。表明山苍子油在加热的条件下,其抗菌成分具有很好的热稳定性并未受到显著影响。
综上所述得出山苍子油在121℃以下具有热稳定性,这一性质对于一些需经高温处理的食品的防腐保鲜具有重要意义。
3、山苍子油的最低抑菌浓度( MIC)
MIC 值是测定抗菌物质抗菌活性大小的指标。由表2 可见,山苍子油对黑曲霉的抗性很强,当浓度达到0.11μL/mL 时平板中没有检出菌落,对大肠杆菌的最小抑菌浓度( MIC) 为0.23μL/mL,对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的最小抑菌浓度( MIC) 均为0.47μL/mL。对革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的抑菌作用要比革兰氏阴性菌大肠杆菌弱。山苍子油对几种菌的MIC 值较小,在低体积浓度下即能有效抑制食品腐败菌的生长,具有较强的抑菌活性。
试验总结
山苍子油对供试霉菌抑菌效果最好,其次细菌;山苍子油对大肠杆菌的最小抑菌浓度( MIC) 均为0.23μL/mL,对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的最小抑菌浓度( MIC) 均为0.47μL/mL;山苍子油具有较强的热稳定性。
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