大蒜又名胡蒜、葫、独蒜、独头蒜,是百合科葱属植物的地下鳞茎。大蒜富含生物活性成分和营养成分,作为民间用药在我国及世界各地皆有数千年的历史。中医中大蒜具有“通五脏、达诸窍、去寒湿、避邪恶、消臃肿、化积食”等功能。目前已证明大蒜具有抗菌、抗病毒、降血脂、降血压、抗氧化、提高免疫功能及抗肿瘤等功效。大蒜中起主要作用的是大蒜油,其含量仅占大蒜
的0.2%。
大蒜油对实验小鼠的镇咳祛痰作用
陈佳敏,许志威,鄢文佳等
试验目的
探讨大蒜油对小鼠的镇咳、祛痰作用。
镇咳试验
1. 引咳实验
取昆明小鼠50 只,随机分为5组,每组10 只,♀♂各半,即氢溴酸右美沙芬糖浆(10 mL/kg)处理组、溶剂对照组(玉米油处理)、大蒜油低剂量组(25 mg/kg、大蒜油中剂量组(50 mg/kg、大蒜油高剂量组(100 mg/kg)。连续给药2 d,上、下午各一次。第3 天上午给药前禁食不禁水12 h,给药1 h 后,将小鼠放入1 000 mL 的大烧杯并罩住烧杯口,用超声喷雾器以最小风速向烧杯中通入25%氨水,喷雾15 s 后关闭,观察并记录咳嗽潜伏期及2 min 内咳嗽次数(以腹肌收缩,同时张大嘴为小鼠咳嗽1 次),计算咳嗽抑制率,并求出止咳活性。咳嗽抑制率=(空白组咳嗽数-给药组咳嗽数)/空白组咳嗽数×100%。止咳活性=给药组咳嗽抑制率/阳性药组咳嗽抑制率×100%。
2 .气管黏膜上皮病理组织学检查
引咳后将小鼠颈椎脱臼处死,仰卧位固定,暴露气管,剥离气管周围组织,剪下部分气管标本用10%的甲醛溶液固定,按常规方法制作病理切片及HE 染色,在光学显微镜下观察其气管黏膜上皮的病变,以病变改善情况来显示大蒜油对轻微气道炎症的治疗作用。
祛痰试验
1. 酚红标准曲线
准确称取一定量的酚红,加5%碳酸氢钠溶液溶解,配成1 mL 含100 μg 酚红的溶液,然后顺次稀释为每毫升含酚红1,2,3,4,5,6 μg,于546 nm 处测得吸光度(A)。以酚红剂量(C)为横坐标、吸光度(A)为纵坐标,制作标准曲线,计算回归方程。
2. 酚红排泌实验
取昆明小鼠50 只,随机分为5 组,每组10 只,♀♂各半,即盐酸氨溴索口服溶液处理组,溶剂对照组(玉米油处理)、大蒜油低剂量组(25 mg/kg) 、大蒜油中剂量组(50 mg/kg)、大蒜油高剂量组(100 mg/kg)。连续给药2 d,上、下午各一次。第3 天上午给药前禁食不禁水12 h,给药30 min 后,给小鼠腹腔注射0.25%酚红溶液10 mL/kg。1 h 后将小鼠颈椎脱臼处死,仰卧位固定,暴露气管,剥离气管周围组织,自甲状软骨下至气管分支前剪下一段气管,要求每只小鼠剪下的气管等长,放入离心管中,加入5 mL 5%碳酸氢钠溶液,3 000 r/min 离心5 min 后,取上清液,用分光光度计在546 nm处测量并记录吸光值。代入上述回归方程计算小鼠酚红排泌量。
统计学方法
数据以“平均值±s”表示,采用SPSS17.0 软件处理实验数据,并进行t 检验及方差分析。P<0.05 为差异有统计学意义。
试验结果
1. 镇咳试验结果
1.1 引咳实验结果
与溶剂对照组比较,大蒜油各组的小鼠咳嗽潜伏期均延长(P<0.01),而小鼠2 min 内咳嗽次数减少(P<0.01),与溶剂对照组比较具有显著差异;大蒜油的镇咳作用随剂量增加而增加,高剂量组(100 mg/kg)镇咳效果优于氢溴酸右美沙芬糖浆处理组(P<0.05)。大蒜油的低、中、高剂量组镇咳作用明显,其中中、高剂量组咳嗽抑制率及止咳活性要比氢溴酸右美沙芬糖浆处理组强;且大蒜油的咳嗽抑制率及止咳活性随剂量增加而增加,存在明显的量效关系。具体结果见表1 和表2。
1.2 气管黏膜上皮病理组织学检查结果
光镜下观察,正常小鼠气管黏膜上皮的细胞组成和结构见图1A。溶剂对照组小鼠气管黏膜上皮脱落,黏膜充血明显,大量炎性细胞浸润,黏膜分泌物显著增多,见图1B 箭头所示。大蒜油低剂量组小鼠气管黏膜充血较溶剂对照组减弱,炎症细胞减少,见图1C 箭头所示。大蒜油中剂量组小鼠上述病变显著好转,黏膜分泌物显著减少,黏膜上皮再生,接近正常小鼠气管壁结构,见图1D。大蒜油高剂量组和氢溴酸右美沙芬糖浆处理组小鼠病变基本消失,与正常小鼠的气管壁比较基本无差别,见图1E 和1F。
2. 祛痰实验结果
由酚红溶液标准曲线得回归方程为y=0.119 7x+0.0206。
相对于溶剂对照组,盐酸氨溴索口服溶液处理组和大蒜油中、高剂量组能增加气道酚红的排泌量(P<0.01 或P<0.05);同时,大蒜油各组的酚红排泌量随剂量的增加而增加,且大蒜油高剂量组(100 m/kg)增加酚红排泌的作用与盐酸氨溴索口服溶液处理组相当。结果见表3。
结论
大蒜油具有显著的镇咳祛痰及黏膜保护作用,能抑制气管黏膜炎症、充血及黏液分泌。
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