黄芪是豆科植物蒙古黄芪[Astragalus memberanaceus ( Fisch) Bge. var.mongholicus ( Beg. ) Hsiao]或膜夹黄芪[A.membranaceus( Fisch.) Bunge]的干燥根,为兽医临床最常用的中药之一。 传统中兽医理论认为,黄芪能够补益正气,升举脾阳,维持脾气健运,促进动物对水谷精微的吸收。肉鸡的消化道较短,对中药有效成分的吸收不够充分,这使得包括黄芪在内的各种中药在肉鸡养殖中的应用受到限制。超微粉能有效解决这一瓶颈,超微粉是指将颗粒粉碎至微米甚至纳米级的粉末,已有研究表明,粉碎后的植物细胞壁被破坏,溶出度增加,生物利用度提高。因此,将黄芪制成超微粉增强其在动物机体内的吸收具有重要意义。
黄芪超微粉对三黄鸡小肠绒毛形态结构、肠内容物消化酶活性和盲肠菌群的影响
邓必贤,邓文琼,李健,马玉芳,黄一帆
试验目的
在与生产性能相符的基础上,从三黄鸡小肠绒毛形态结构、十二指肠内容物消化酶活性和盲肠菌群入手,研究黄芪超微粉对三黄鸡肠道消化吸收的影响,旨在为与饲料的配合应用提供科学依据。
试验设计与分组
225羽1 日龄三黄公雏按照体重相近的原则,随机分为5个处理组,每处理组3个重复,每重复15羽。试验Ⅰ组为对照组,饲喂基础日粮; 试验Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组为黄芪超微粉组,分别在基础日粮中添加0.50%、0.75%和1.00%黄芪超微粉; 试验Ⅴ组为黄芪粗粉组,在基础日粮中添加1.00%黄芪粗粉。 试验期70 d,分为两个阶段,1-28 d 为第1 阶段,29-70 d 为第2 阶段。
饲养管理
采用封闭式悬空笼子饲养,进鸡苗之前,所有笼子和鸡舍进行全方位的打扫、清理和消毒。2 周以上的无雏间歇期,采用红外灯保温,试验开始时,第1 周室内温度保持在35 ℃左右,以后每周降低2-3 ℃,达到室温后恒温。 所有鸡只自由采食,饮水,按肉鸡常规管理及正常程序免疫。
指标测定
1、小肠绒毛形态结构
试验第28 和70 天时,各处理组每个重复随机抽取体质健康、体重中等的3只肉鸡进行屠宰解剖,剪取十二指肠、空肠和回肠中段约2 cm 长。肠段用生理盐水清洗干净后,吸水纸吸干肠道水分,放入4%多聚甲醛固定24 h,之后流水冲洗24 h,样品进行脱水、透明、浸蜡、石蜡包埋、修片、连续切片、HE 染色后,烘干过夜,树胶封固. 每个样本选取2 张绒毛伸展情况良好的组织切片,每张切片选取3 根绒毛,通过软件检测绒毛长度和隐窝深度,取平均值,并计算绒毛长度与隐窝深度的比值( 绒毛长度/隐窝深度) 。
2、十二指肠内容物消化酶活性
试验第28 和70 天时,各处理组每个重复随机抽取肉鸡3 只进行屠宰解剖,迅速采集新鲜十二指肠内容物,按不同比例稀释,在冰水浴条件下机械匀浆,于4 ℃、2500 r/min离心10 min,取上清液,检测内容物淀粉酶、脂肪酶和胰蛋白酶的活性,按照试剂盒操作要求检测。
3、盲肠菌群试验
第28 和70 天时,各处理组每个重复随机抽取肉鸡3 只进行屠宰解剖,剪取两段盲肠,装入无菌自封袋,于无菌超净台中操作。测定方法: 无菌称取1 g 食糜,盛入带有小玻璃珠的瓶子,加入99 mL 无菌生理盐水( 10-2倍) ,混匀。吸取1 mL 菌液至下一灭菌试管中,加入9 mL 无菌生理盐水逐级10 倍稀释,取10-3、10-4和10-5用于大肠杆菌接种平板,接种量为100 μL;取10-5、10-6和10-7用于乳酸杆菌接种平板,接种量为100 μL。接种后的培养皿用灭菌弯曲玻璃棒小心摊匀,每个样品3 个平行,接种完后倒置放置,全程均为无菌操作。
每克盲肠内容物菌落数= lg( 菌落数× 稀释倍数× 每次稀释取样毫升数) /( 接种用样品毫升数×样品克数)
结果与分析
1、三黄鸡肠道绒毛形态结构的变化
黄芪超微粉对三黄鸡肠道绒毛形态结构的影响见表2。 由表2 可知:试验第28 天时,各处理组间绒毛长度和隐窝深度的差异不显著( P>0.05) ; 与Ⅰ组相比,Ⅱ和Ⅲ组十二指肠绒毛长度/隐窝深度分别提高8.56%( P<0.05) 和8.39% ( P<0.05) ,各处理组空肠和回肠绒毛长度/隐窝深度的差异不显著( P>0.05) 。试验第70 天时,与Ⅰ组相比,Ⅲ组十二指肠绒毛长度提高14.11% ( P<0.05) ,Ⅱ和Ⅲ组十二指肠绒毛长度/隐窝深度分别提高12.38%( P<0.05) 和25.53%( P<0.01); Ⅱ组回肠绒毛长度/隐窝深度较Ⅰ和Ⅴ组分别提高10.91%( P<0.05) 和12.73%( P<0.05)。
从图1 可以看出:试验第70 天时,Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组十二指肠绒毛长度与Ⅰ和Ⅴ组相比,绒毛较细长、浓密、整齐。
2、三黄鸡十二指肠内容物消化酶活性的变化
黄芪超微粉对三黄鸡十二指肠内容物消化酶活性的影响见表3。 由表3 可知,试验第28 天时,黄芪超微粉组淀粉酶的活性都有升高的趋势。其中,Ⅲ组淀粉酶活性较Ⅰ和Ⅴ组分别提高9.59% ( P<0. 05) 和8.01%( P<0.05); Ⅲ组脂肪酶活性较Ⅰ组提高10.65%( P<0.05) ; Ⅱ组胰蛋白酶活性较Ⅰ和Ⅴ组分别提高27.03%( P<0.01) 和14.91%( P<0.05) 。试验第70 天时,与Ⅰ组相比,Ⅲ组淀粉酶活性提高13.86%( P<0.05) ; Ⅱ和Ⅲ组脂肪酶活性分别提高11.81% ( P<0.05) 和12.76% ( P<0.05) ; Ⅱ组胰蛋白酶活性提高9.18%( P < 0.05) 。
3、三黄鸡盲肠菌群的变化
黄芪超微粉对三黄鸡盲肠菌群的影响见表4。 由表4 可知:试验第28 天时,与Ⅰ组相比,Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组大肠杆菌数量分别降低1.06%( P>0.05) 、4.10%( P<0.05) 和0.66%( P>0.05) ,乳酸杆菌数量分别增加4.14%( P>0.05) 、8.65%( P<0.05) 和4.75%( P>0.05) ,与Ⅴ组的差异不显著( P>0.05) ; 试验第70 天时,与Ⅰ组相比,Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组大肠杆菌数量分别降低6.89%( P>0.05) 、9.18%( P<0.05) 和4.32%( P>0.05) ,乳酸杆菌数量分别增加4.20%( P>0.05) 、6.71%( P<0.05) 和3.36%( P>0.05) ,与Ⅴ组的差异不显著( P>0.05) 。
结论
本试验结果表明,日粮中添加黄芪超微粉能改善三黄鸡小肠绒毛形态结构,不同程度提高绒毛长度/隐窝深度,提高十二指肠内容物消化酶活性,并且增加盲肠乳酸杆菌数量,抑制大肠杆菌数量,对肠道的消化吸收环境具有改善作用,其适宜的添加量为0.75%。
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